當(dāng)紫外光照射某一物質(zhì)時(shí)，該物質(zhì)會(huì)在極短的時(shí)間內(nèi)，發(fā)射出較照射波長(zhǎng)為長(zhǎng)的光。而當(dāng)紫外光停止照射時(shí)，這種光也隨之很快消失，這種光稱為熒光。熒光是一種光致發(fā)光現(xiàn)象。如前所述，分子吸收了某一波長(zhǎng)區(qū)的輻射能后，它的電子可躍遷至激發(fā)態(tài)，然后以熱能形式將這一部分能量釋放出來(lái)，本身又恢復(fù)到基態(tài)。如果吸收輻射能后處于電子激發(fā)態(tài)的分子以發(fā)射輻射的方式釋放這一部分能量，即為光至發(fā)光。再發(fā)射的波長(zhǎng)與分子所吸收的波長(zhǎng)可以相同，也可以不同。物質(zhì)所吸收光的波長(zhǎng)和發(fā)射的熒光波長(zhǎng)與物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系。同一種分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，用同一波長(zhǎng)的激發(fā)光照射，可發(fā)射相同波長(zhǎng)的熒光，但其所發(fā)射的熒光強(qiáng)度隨著該物質(zhì)濃度的增大而增強(qiáng)。利用這些性質(zhì)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法，稱為熒光光譜分析法，也稱為熒光分光光度法。這種方法具較高的選擇性及靈敏度，試樣量少，操作簡(jiǎn)單，且能提供比較多的物理參數(shù)，現(xiàn)已成為生化分析和研究的常用手段。
J@i9)D_ jZ"j_ =o@ 1. 熒光的產(chǎn)生及其與分子結(jié)構(gòu)的關(guān)系：
i"+TKo- -ert4 2fN 1) 熒光的產(chǎn)生：
FQ 0 ; %Z v.sjWF 當(dāng)光進(jìn)入某種物質(zhì)后，可以有兩種情況：一種是進(jìn)入物質(zhì)后，能量幾乎不被吸收；另一種是能量被全部或部分吸收。在后一種情況下，在吸收光的過(guò)程中，光能被轉(zhuǎn)移給分子。根據(jù)量子理論，分子從光波中吸收能量是不連續(xù)的、整份單位的形式發(fā)生，這些不連續(xù)的微小能量單位被稱為光量子。這也就是說(shuō)，頻率n的單色光的能量必定是hn的整數(shù)倍。每個(gè)光量子的能量
O9<oq H}&JrT95 E=hn=hc/λ=hcω,
kZ6:= l |}8SjZcQW 這里，h為普朗克常數(shù)，6.63×10－34J/s；ω為波長(zhǎng)，即1cm長(zhǎng)度中電磁波的數(shù)目。從公式可見(jiàn)，能量E與λ成反比。
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