為達到準確測量的目的,需要了解測量過程的環(huán)境,影響因素及可使用材料的情況:
'E&tEbY 1.可能被用于標記的熒光,光譜都較寬沒有銳線,準確可知,可校驗。無需分辨率很高的分析裝置。
xS>vmnW 3b|=V 2.細胞存在自發(fā)熒光。
H32o7]lT 3.熒光強度與激發(fā)光強度相關(guān)。
{Kf5a
m 4.由于熒光代表核內(nèi)物質(zhì)濃度,而細胞內(nèi)物質(zhì)位置不固定,所以其空間放射是不均勻的,又由于細胞質(zhì)與體液雖有折射率差但不會很大,所以雖不均勻不會有過大的突變和大的量差異,這個只能通過實驗獲得數(shù)據(jù)。
TB-dV'w 5.熒光本身很微弱。
pKno~jja 6.由于聚焦技術(shù),細胞在導流腔內(nèi)一定是延中心軸附近排列移動的,但測量時細胞在Z軸的位置是不固定的。
ltlo$`PR ,,!P-kK$ 7.測量細胞大小認為是大多數(shù)的<100um。